En la nueva aventura de Donatello, Miguel Ángel, Rafael y Leonardo repetirán los actores Megan Fox (como la reportera April O'Neil), William Fichtner, Will Arnett, Brian Tee y Johnny Knoxville, quien volvió a prestar su voz para el personaje de Splinter.
Además de su archienemigo Destructor, las tortugas enfrentarán en esta ocasión a Bebop y Rocoso.
